Ús previst

La prova combinada Dengue NS1 Ag-IgG/IgM és un immunoassaig cromatogràfic ràpid per a la detecció qualitativa d'anticossos (IgG i IgM) i l'antigen NS1 del virus del dengue al virus del dengue en sèrum o plasma per ajudar en el diagnòstic de la infecció viral del dengue.

[RESUM]

El dengue és una malaltia infecciosa aguda transmesa per vectors causada pel virus del dengue transmès pels mosquits.La infecció pel virus del dengue pot provocar una infecció recessiva, febre del dengue, febre hemorràgica del dengue, febre hemorràgica del dengue.Les manifestacions clíniques típiques de la febre del dengue inclouen inici sobtat, febre alta, mal de cap, dolor muscular, ossi i articular intens, erupció cutània, tendència a l'hemorràgia, augment dels ganglis limfàtics, disminució del nombre de glòbuls blancs, trombocitopènia, etc. en alguns pacients.Aquesta malaltia es troba bàsicament a la popularitat de les zones tropicals i subtropicals, perquè aquesta malaltia es transmet pel mosquit Aides, per la qual cosa la popularitat té certa estacionalitat, cada any habitualment entre maig i novembre, el màxim és entre juliol i setembre.A la nova zona epidèmica, la població és generalment susceptible, però la incidència és principalment adulta, a la zona endèmica la incidència és principalment infantil.

Principi

La prova combinada Dengue NS1 Ag-IgG/IgM és un immunoassaig qualitatiu basat en tires de membrana per a la detecció d'anticossos del virus del dengue (IgG i IgM) i antigen del virus del dengue NS1 en sèrum o plasma.

Per a la prova IgG/IgM: el dispositiu de prova consisteix en: 1) un coixinet conjugat de color bordeus que conté antígens d'embolcall recombinant del dengue conjugats amb or col·loide (conjugats del dengue), 2) una tira de membrana de nitrocel·lulosa que conté dues línies de prova (línies T1 i T2) i una línia de control (línia C).La línia T1 està recoberta prèviament amb l'anticossos per a la detecció d'IgM anti-dengue, la línia T2 està recoberta d'anticossos per a la detecció d'IgG anti-dengue.Quan es distribueix un volum adequat de mostra de prova al pou de mostra del casset de prova, la mostra migra per acció capil·lar a través del casset.IgG anti-dengue, si està present a la mostra, s'unirà als conjugats del dengue.A continuació, l'immunocomplex és capturat pel reactiu prerevestit a la banda T2, formant una línia T2 de color bordeus, que indica un resultat positiu de la prova de dengue IgG i suggereix una infecció recent o repetida.IgM anti-dengue si està present a la mostra s'unirà als conjugats del dengue.A continuació, l'immunocomplex és capturat pel reactiu recobert a la línia T1, formant una línia T1 de color bordeus, que indica un resultat positiu de la prova de dengue IgM i suggereix una nova infecció.L'absència de cap línia T (T1 i T2) suggereix un resultat negatiu.

Per a la prova NS1: en aquest procediment de prova, l'anticòs anti-dengue NS1 s'immobilitza a la regió de la línia de prova del casset.Després de col·locar una mostra de sang sencera/sèrum/plasma a la mostra, reacciona amb les partícules recobertes d'anticossos anti-Dengue NS1 que s'han aplicat al coixinet de la mostra.Aquesta barreja migra cromatogràficament al llarg de la tira de prova i interacciona amb l'anticòs anti-Dengue NS1 immobilitzat.Si la mostra conté antigen NS1 del virus del dengue, apareixerà una línia de color a la regió de la línia de prova que indicarà un resultat positiu.Si la mostra no conté l'antigen NS1 del virus del dengue, no apareixerà una línia de color en aquesta regió que indiqui un resultat negatiu.

Per servir com a control de procediment, sempre apareixerà una línia de color a la regió de la línia de control que indica que s'ha afegit el volum adequat d'espècimen i que s'ha produït una absorció de la membrana.

Emmagatzematge i estabilitat

Emmagatzemeu tal com s'envasa a la bossa segellada a temperatura ambient o refrigerat (4-30 ℃ o 40-86 ℉).El dispositiu de prova és estable fins a la data de caducitat impresa a la bossa segellada.

La prova ha de romandre a la bossa tancada fins al seu ús.

Recollida i preparació de mostres

1. La prova combinada de Dengue NS1 Ag-IgG/IgM es pot realitzar utilitzant en sèrum o plasma.

2. Recollir mostres de sang sencera, sèrum o plasma seguint els procediments habituals de laboratori clínic.

3. Les proves s'han de realitzar immediatament després de la recollida de la mostra.No deixeu les mostres a temperatura ambient durant períodes prolongats.Per a l'emmagatzematge a llarg termini, les mostres s'han de mantenir per sota dels 20 ℃.

4. Porteu les mostres a temperatura ambient abans de la prova.Les mostres congelades s'han de descongelar completament i barrejar bé abans de la prova.Les mostres no s'han de congelar i descongelar repetidament.

Procediment de prova

Deixeu que la prova, la mostra, el tampó i/o els controls arribin a la temperatura ambient de 15-30 ℃ (59-86 ℉) abans de la prova.

1. Porta la bossa a temperatura ambient abans d'obrir-la.Traieu el dispositiu de prova de la bossa segellada i utilitzeu-lo tan aviat com sigui possible.Col·loqueu el dispositiu de prova sobre una superfície neta i plana.

2. Per a la prova d'IgG/IgM: Mantingueu el comptagotes verticalment i transferiu 1 gota de mostra (aproximadament 10 μl) al pou (S) de la mostra del dispositiu de prova, després afegiu 2 gotes de tampó (aproximadament 70 μl) i engegueu el temporitzador.Vegeu la il·lustració a continuació.

3. Per a la prova NS1: subjecteu el comptagotes verticalment i transferiu 8~10 gotes de sèrum o plasma (aproximadament 100 μl) al pou(S) de la mostra del dispositiu de prova i, a continuació, engegueu el temporitzador.Vegeu la il·lustració a continuació.

4. Espereu que apareguin les línies de colors.Llegeix els resultats als 15 minuts.No interpreteu el resultat després de 20 minuts.

Interpretació de resultats

Positiu:

Per a la prova IgG/IgM: la línia de control i almenys una línia de prova apareixen a la membrana.L'aparició de la línia de prova T2 indica la presència d'anticossos IgG específics del dengue.L'aparició de la línia de prova T1 indica la presència d'anticossos IgM específics del dengue.I si apareixen tant la línia T1 com la T2, indica la presència d'anticossos IgG i IgM específics del dengue.Com més baixa és la concentració d'anticossos, més feble és la línia de resultats.

Per a la prova NS1: apareixen dues línies.Una línia hauria d'aparèixer sempre a la regió de la línia de control (C) i una altra línia de color aparent hauria d'aparèixer a la regió de la línia de prova.

Negatiu:

Apareix una línia de color a la regió de control (C). No apareix cap línia de color aparent a la regió de la línia de prova.

No vàlid: la línia de control no apareix.Un volum de mostra insuficient o tècniques de procediment incorrectes són els motius més probables de la fallada de la línia de control.Reviseu el procediment i repetiu la prova amb un dispositiu de prova nou.Si el problema persisteix, deixeu d'utilitzar el kit de prova immediatament i poseu-vos en contacte amb el vostre distribuïdor local.